CORE_REFERENCE // ARTICLE_VIEW

Результаты тестов

lang: ru

Синопсис: Воздействие радиации мобильного телефона на клетки нормальных человеческих астроцитов с защитой MRET-Nylon и без неё

Игорь Смирнов, Ph.D.

Global Quantech Inc., Калифорния, США

Введение: Астроциты — это подтип глиальных клеток мозга и спинного мозга. Их также называют астроцитарными глиальными клетками. Они имеют звёздчатую форму, их многочисленные отростки окружают синапсы, образованные нейронами. Астроциты классически идентифицируются гистологически, так как многие из этих клеток экспрессируют промежуточный филамент — глиальный фибриллярный кислый белок (GFAP).

_{Рис. 1 Астроциты можно визуализировать в культуре, потому что, как и другие глии, они экспрессируют глиальный фибриллярный кислый белок. [Wikipedia]}

-Структурная функция: участвуют в физическом формировании структуры мозга.
Метаболическая поддержка: обеспечивают нейроны питательными веществами, такими как лактат.
-Гематоэнцефалический барьер: отростки астроцитов, окружающие эндотелиальные клетки, считались важными для поддержания гематоэнцефалического барьера, но недавние исследования показывают, что основную роль играют плотные контакты и базальная мембрана эндотелиальных клеток мозга. Однако недавно было показано, что активность астроцитов связана с кровотоком в мозге, и именно это измеряется с помощью fMRI.
-Реабсорбция и высвобождение нейромедиаторов: астроциты экспрессируют мембранные транспортеры, такие как глутаматные транспортеры для нескольких нейромедиаторов, включая глутамат, АТФ и ГАМК. Недавно было показано, что астроциты могут высвобождать глутамат или АТФ в везикулярной, Ca2+-зависимой манере. Однако это высвобождение глутамата пока не доказано.
-Регуляция концентрации ионов в внеклеточном пространстве: астроциты экспрессируют калиевые каналы с высокой плотностью. Когда нейроны активны, они выделяют калий, увеличивая его концентрацию во внеклеточном пространстве. Поскольку астроциты очень проницаемы для калия, они быстро удаляют его избыток. Если эта функция нарушается, концентрация калия повышается, что приводит к деполяризации нейронов по уравнению Гольдмана. Известно, что аномальное накопление калия вызывает эпилептическую активность нейронов.
-Модуляция синаптической передачи: в супраоптическом ядре гипоталамуса быстрые изменения морфологии астроцитов влияют на гетеросинаптическую передачу между нейронами. В гиппокампе астроциты подавляют синаптическую передачу, высвобождая АТФ, который гидролизуется эктонуклеотидазами с образованием аденозина. Аденозин действует на аденозиновые рецепторы нейронов, ингибируя синаптическую передачу и увеличивая динамический диапазон для LTP.
-Вазомодуляция: астроциты могут служить посредниками в нейрональной регуляции кровотока.
Ремонт нервной системы: при повреждении нервных клеток в ЦНС астроциты становятся фагоцитами, поглощая повреждённые клетки. Затем они заполняют пространство, формируя глиальный рубец, восстанавливая область и заменяя клетки ЦНС, которые не могут регенерировать.

Недавние исследования показали, что астроциты играют важную роль в регуляции нейральных стволовых клеток. Исследования Института исследований глаза Шепенса при Гарварде показывают, что человеческий мозг богат нейральными стволовыми клетками, которые поддерживаются в неактивном состоянии химическими сигналами (эфрин-A2 и эфрин-A3) от астроцитов. Астроциты могут активировать стволовые клетки, чтобы они превращались в рабочие нейроны, снижая высвобождение эфрина-A2 и эфрина-A3. Кроме того, ведутся исследования, определяющие, играют ли астроглии ключевую роль в депрессии, основываясь на связи между диабетом и депрессией. Изменённый метаболизм глюкозы в ЦНС наблюдается при обоих состояниях, и астроглиальные клетки — единственные клетки с инсулиновыми рецепторами в мозге. [Wikipedia]

Экспериментальный протокол: Эксперимент проводился в AltheaDx Technology, Сан-Диего, под руководством директора проекта: Цян Сюй, Ph.D., научного сотрудника: Пэт Пеццоли, B.S., техника проекта: Нил Тедески, M.S.

Нормальные человеческие астроциты (NHA) (Lonza #CC-2565, Lot 80982) выращивались в увлажнённом инкубаторе при 37°C и 5% CO2 и размножались до получения достаточного количества клеток для эксперимента. Клетки собирали с помощью трипсина и подсчитывали на гемоцитометре с использованием трипанового синего. Жизнеспособность составила 88,9%, и 281 667 клеток на лунку было посеяно в шесть лунок, по две лунки на трёх планшетах по шесть лунок. Клетки инкубировали на ночь.
Мобильный телефон LG Verizon, модель # VX8350, FCC ID BEJVX8350, версия ПО # VX835V03, HW Rev. 1.1, MEID A000000C4F8FC5, с питанием от сети был размещён непосредственно под одной из планшет с культурами NHA на расстоянии 0,5 дюйма под поверхностью роста (см. рисунки 3 и 4).
Чип MRET®-Nylon относится к новому поколению материалов для экранирования электромагнитного излучения на основе технологии молекулярного резонансного эффекта, разработанной Игорем Смирновым, Ph.D. Полимерный компаунд MRET®-Nylon имеет особую фрактальную геометрическую структуру. Благодаря структуре фрактальных наноколец и усиленным пьезоэлектрическим свойствам этот компаунд генерирует случайные, тонкие, низкочастотные колебания при воздействии внешнего электромагнитного излучения (ЭМИ). Этот полимер может значительно снижать биологические эффекты электромагнитного излучения, как тепловые, так и нетепловые, накладывая случайные низкочастотные колебания («шумовое поле») на радиочастотные волны. Теоретическая концепция электромагнитного шумового поля связана со способностью шумового поля компенсировать тепловые эффекты.

Телефон был вызван другим телефоном, а трубка вызывающего телефона была размещена рядом с динамиком работающего радиоприёмника, чтобы мобильный телефон оставался активным на протяжении всего воздействия. Клетки подвергались радиации телефона в течение одного часа при комнатной температуре. После часового воздействия клетки возвращали в инкубатор на 24 часа. Вторая идентичная культура NHA подвергалась аналогичному воздействию того же телефона и в той же геометрии, но с добавлением защиты MRET-Nylon, которая была размещена над динамиком телефона (см. рисунок 5).

Клетки подвергались радиации мобильного телефона в течение одного часа, затем их помещали в инкубатор на 24 часа. Во время воздействия телефона с защитой MRET-Nylon третья планшетка с идентичными клетками была помещена в другую комнату на один час и была обозначена как контрольная. После одного часа инкубации при комнатной температуре без воздействия мобильного телефона её также возвращали в инкубатор на 24 часа.

После 24-часовой инкубации клетки из каждой лунки собирали с помощью трипсина и подсчитывали на гемоцитометре с использованием трипанового синего для получения данных о количестве клеток и их жизнеспособности. Данные по количеству клеток включали повторяющиеся лунки для каждого условия. Каждая лунка собиралась с использованием одинаковых объёмов и подвергалась одинаковым манипуляциям пипеткой.

Для каждого образца РНК выделяли из дублирующей лунки — верхней лунки, показанной в экспериментальной схеме. РНК обрабатывали согласно протоколу Affymetrix GeneChip Whole Transcript (WT) Sense Target Labeling Assay. Полученная меченая кДНК гибридизовалась с чипами Affymetrix Human Gene 1.0 ST и сканировалась. Данные нормализовали с помощью RMA-нормализации в программе Affymetrix Expression Console.

Эти нормализованные данные использовались для корреляционного анализа.

Эксперимент in vitro показал, что количество клеток нормальных человеческих астроцитов после воздействия радиации мобильного телефона с защитой MRET-Nylon уменьшилось на 20% меньше по сравнению с образцами клеток, подвергшихся такому же воздействию без защиты MRET-Nylon, и на 12% меньше по сравнению с контрольными образцами, не подвергавшимися воздействию радиации мобильного телефона (см. рисунок 6). Эксперимент также показал, что жизнеспособность клеток нормальных человеческих астроцитов при воздействии радиации мобильного телефона с защитой MRET-Nylon была на 3% выше по сравнению с жизнеспособностью клеток, подвергшихся такому же воздействию без защиты MRET-Nylon.

Рис. 6 Количество клеток человеческих астроцитов: До эксперимента (до 1 часа воздействия радиации мобильного телефона при комнатной температуре и 24 часов инкубации после воздействия); Контроль (после 1 часа при комнатной температуре без воздействия радиации мобильного телефона и 24 часов инкубации после воздействия); Телефон без MRET-Nylon (после 1 часа воздействия радиации мобильного телефона при комнатной температуре без защиты MRET и 24 часов инкубации после воздействия); Телефон с MRET-Nylon (после 1 часа воздействия радиации мобильного телефона при комнатной температуре с защитой MRET и 24 часов инкубации после воздействия).

Сравнение данных: Для сравнения каждого образца использовался коэффициент корреляции Пирсона. Коэффициент 1 означает идеальную корреляцию, а 0 — отсутствие корреляции. Все образцы коррелировали на уровне 0,99 и выше.

Для дальнейшего сравнения была построена «тепловая карта». Модели экспрессии схожи во всех образцах:

Вывод: Эксперимент in vitro показал, что количество клеток нормальных человеческих астроцитов после одного часа воздействия радиации мобильного телефона с защитой MRET-Nylon уменьшилось на 20% меньше по сравнению с образцами клеток, подвергшихся такому же воздействию без защиты MRET-Nylon, и на 12% меньше по сравнению с контрольными образцами, не подвергавшимися воздействию радиации мобильного телефона. Эксперимент также показал, что жизнеспособность клеток нормальных человеческих астроцитов при воздействии радиации мобильного телефона с защитой MRET-Nylon была на 3% выше по сравнению с жизнеспособностью клеток, подвергшихся такому же воздействию без защиты MRET-Nylon.

Визуальный осмотр образцов клеток с помощью микроскопии не выявил значительных различий между контрольными и подвергшимися воздействию образцами. Микроанализ показал отсутствие различий в паттернах экспрессии мРНК между тремя типами образцов. Таким образом, это исследование предоставляет некоторые доказательства того, что однократное часовое воздействие радиации мобильного телефона на клетки нормальных человеческих астроцитов с последующей 24-часовой инкубацией не влияет на генетику клеток. С другой стороны, был обнаружен измеряемый эффект радиации мобильного телефона на количество клеток и их жизнеспособность.

Исследование подтвердило, что применение чипа MRET-Nylon на мобильном телефоне снижает негативный биологический эффект микроволнового излучения за счёт повышения жизнеспособности клеток и устойчивости к тепловым и нетепловым биологическим эффектам ЭМИ.

_______________________________________________________________________________________________

Влияние материала MRET-Shield на значения SAR мобильных телефонов

ОБСУЖДЕНИЕ

Показатель удельного коэффициента поглощения (SAR) характеризует уровень поглощения ЭМИ тканями организма. Поглощение ЭМИ биологическими системами может привести к искажению механизмов клеточной трансдукции, развитию теплового эффекта в клетках, их повреждению и, как следствие, к нарушению клеточных функций. По этим причинам FCC (Федеральная комиссия по связи США) установила стандарты допустимых значений SAR в диапазоне 0,2—2,0 Вт/кг. Снижение значений SAR, очевидно, благоприятно для здоровья человека. Оценка теста выявила два ключевых результата:

Применение MRET-Shield к радиочастотным телефонам не приводит к значимому искажению передаваемых радиочастотных сигналов.
В каждом эксперименте значения SAR измерялись в 242 точках «фантома головы». Применение MRET-Shield к радиочастотным телефонам показало, что «горячие точки» остались в тех же местах, что и без MRET-полимера, а их амплитуды уменьшились в 90% точек данных. Применение MRET-Shield к радиочастотным телефонам привело к снижению большинства значимых значений SAR в этих экспериментах в диапазоне от 0,3% до 29,0%.

Ниже представлены диаграммы сканирования областей «горячих точек», которые подтверждают, что применение MRET-Shield к радиочастотному телефону не изменило расположение «горячей точки» и значительно снизило значения SAR в исследуемой области.

Диаграммы сканирования областей «горячих точек»

_______________________________________________________________________________________________

Благоприятное влияние MRET-Shield на морфологию крови in vitro после воздействия электромагнитного излучения

Благоприятное влияние материала для экранирования ЭМИ (MRET-Shield) на человеческую кровь in vitro было отмечено в лаборатории Медицинского центра, Лос-Анджелес, США. Изучалось влияние излучения компьютерного монитора на образцы крови человека (22 образца в каждой группе) с установкой MRET-Shield и без неё, а также сравнивалось с контрольной группой, не подвергавшейся воздействию ЭМИ. Образцы крови подвергались воздействию излучения монитора на расстоянии 15 дюймов (0,38 метра) в течение одного часа. Результаты теста статистически достоверны при p<0,01.

Лейкоциты (WBC) состоят из гранулоцитов (GRAN), лимфоцитов (LYM) и «минимального ингибирующего разведения» (MID) — показателя редких клеток и количества предшественников белых клеток. Воздействие ЭМИ компьютерного монитора на образцы крови приводило к изменению соотношения компонентов WBC, особенно к изменению количества гранулоцитов, лимфоцитов и MID (измеряется в %). Установка устройства для экранирования ЭМИ MRET-Shield на монитор значительно снижала уровень изменений количества гранулоцитов и лимфоцитов и практически не влияла на уровень изменений MID. Эти результаты подтверждают снижение стресса после воздействия ЭМИ на образцы крови при установке MRET-Shield на монитор.

Гранулоциты — важный компонент WBC и играют ключевую роль в иммунных реакциях. Их снижение неблагоприятно для гомеостаза организма. Эксперимент показал снижение количества гранулоцитов в образцах крови, подвергшихся воздействию ЭМИ. Также было показано, что установка MRET-Shield на монитор снижает уровень изменений количества гранулоцитов на 29%.

Увеличение количества лимфоцитов связано с физиологическим ответом на антигенный или воспалительный стимул, инфекцию или другой внешний стресс. Общепринято, что повышение уровня лимфоцитов выше нормы при отсутствии инфекций увеличивает риск лейкемии, лимфом и других нарушений. Эксперимент показал увеличение количества лимфоцитов в образцах крови, подвергшихся воздействию излучения монитора. Также было показано, что установка MRET-Shield на монитор снижает уровень изменений количества лимфоцитов на 38%.

Эксперимент показал увеличение количества MID (минимальное ингибирующее разведение) в образцах крови, подвергшихся воздействию излучения монитора. Снижение уровня изменений MID после установки MRET-Shield было незначительным.

ВЫВОД: Эксперимент показал снижение количества гранулоцитов и увеличение количества лимфоцитов и MID (предшественники белых клеток) в обоих случаях. Существенных изменений общего количества WBC не наблюдалось. Также было показано, что установка MRET-Shield на монитор значительно снижает уровень изменений соотношения гранулоцитов и лимфоцитов.

Изменения в соотношении GRAN были снижены на:

(32 – 26,4)/(46 – 26,4) = 5,6/19,6 = 29%

Изменения в соотношении LYM были снижены на:

(49,4 – 44,3)/(49,4 – 36) = 5,1/13,4 = 38%

Изменения в соотношении MID были незначительно снижены на:

(24,2 – 23,7)/(24,2 – 18) = 0,5/6,2 = 8%

Таким образом, суммарные изменения в соотношениях GRAN, LYM и MID после воздействия ЭМИ от монитора были:

без MRET-Shield: 19,6 (GRAN) + 13,4 (LYM) + 6,2 (MID) = 39,2%

с MRET-Shield: 14 (GRAN) + 8,3 (LYM) + 5,7 (MID) = 28%

Этот расчёт показывает, что установка MRET-Shield на монитор снизила уровень суммарных изменений в содержании белых кровяных телец (GRAN, LYM и MID) на (39,2 – 28)/39,2 = 29% в этом эксперименте.

Эксперимент подтверждает, что воздействие ЭМИ от монитора влияет на соотношение гранулоцитов и лимфоцитов в WBC. Этот эффект связан со стресс-реакцией и может влиять на клеточные процессы, такие как рост, деление и гибель клеток всех типов WBC. Установка MRET-Shield на монитор значительно снижает влияние ЭМИ на соотношение компонентов WBC (на 29%) и морфологию крови. Результаты статистически достоверны при p<0,01.

_______________________________________________________________________________________________

Термографический тест для MRET-Shield

Тестирование проводилось в Центре электромагнитных исследований SAMEER (Индия, Ченнаи, 25 февраля 2008 г.) по стандартам Международной академии клинической термографии. Испытуемый — мужчина 40 лет. Сначала была зафиксирована базовая термограмма и температура (Рис. 1). Затем испытуемый разговаривал по телефону Nokia 1600 RH 64 в течение 33 минут, после чего была зафиксирована вторая термограмма. Затем на телефон был установлен чип MRET-Shield, и испытуемый снова разговаривал по телефону 33 минуты, после чего была зафиксирована третья термограмма.

Результаты приведены в таблице I. Базовая температура составляла 36,7°C. Повышение температуры от незащищённого телефона составило 1,4°C. После установки MRET-Shield повышение температуры уменьшилось на 0,9°C, то есть устройство снизило нагрев тканей на 64%. На термограммах видно значительное снижение биотермического эффекта после установки MRET-Shield.

ТАБЛИЦА I. НАБЛЮДАЕМЫЕ ТЕМПЕРАТУРЫ

РИСУНОК 1. БАЗОВАЯ ТЕМПЕРАТУРА

_______________________________________________________________________________________________

3D-MRA тест (магнитно-резонансная ангиография — срезы головного мозга)

Благоприятный эффект MRET-Shield подтверждён 3D-MRA тестом, проведённым Tex Chu Technology Corp., Тайбэй, Тайвань. Тест проводился на человеке, подвергавшемся излучению телефона Sony Ericsson T630 с и без MRET-Shield. МРА — это метод визуализации сосудов, используемый для оценки стенозов и аневризм. Применялась техника 'flow-related enhancement' (3D time-of-flight). Анализировались: большие полушария (вид сверху), срез на уровне ствола мозга, артерии мозга (вид снизу), последовательность левого и правого полушарий.

Первая ангиограмма: контроль, без излучения телефона;
Вторая ангиограмма: после излучения телефона без защиты;
Третья ангиограмма: после излучения телефона с MRET-Shield.

Ангиограммы ясно показывают выраженный негативный эффект радиочастотного излучения телефона на сосуды мозга и компенсирующее действие MRET-Shield.

_______________________________________________________________________________________________

Анализ живых клеток крови

Проведён в Quantum Biotech Ltd.

_______________________________________________________________________________________________

ЭЭГ-тесты

ЭЭГ-тесты проводились в лаборатории SA Biomedical Instrumentation Co., Калифорния. Тесты проводились на человеке, подвергавшемся воздействию телефона (SAMSUNG SCH-2000) без и с MRET-Shield.

Каждый тест длился 3 минуты. Телефон располагался у правой стороны головы. Голова испытуемого была покрыта стандартной электрокапой E1-L, подключённой к 4-канальному усилителю SAI Bioelectric Amplifier. Данные снимались с электродов: C4, Fz, F4, T4.

Сравнение ЭЭГ-графиков, отражающих волновую активность мозга:

Контроль: нормальный медленный режим работы мозга.
Воздействие телефона без защиты: возбуждение волновых паттернов мозга.
Воздействие телефона с MRET-Shield: график близок к контролю, частоты синхронизированы и замедлены, спектр становится более когерентным и физиологически оптимальным. Это доказывает, что MRET-Shield нейтрализует электромагнитный стресс.
Воздействие телефона с конкурентным продуктом (Pulse Clean 21): возбуждение волновых паттернов мозга усиливается, что связано с подавлением электромагнитных процессов в клетках.

Установка MRET-Shield синхронизирует и успокаивает частоты мозга, нейтрализуя электромагнитный стресс.

_______________________________________________________________________________________________

Тест клеток черепных нервов

Тест проведён Tex Chu, Inc., Тайвань, на 30 испытуемых для оценки иммунных реакций на ЭМИ с и без MRET-Shield. Результаты статистически достоверны при p<0,01. Тест доказывает, что MRET-Shield поддерживает и усиливает иммунную систему.

_______________________________________________________________________________________________

Сравнительное исследование нейтрализаторов микроволнового излучения

Проведено в Elsys Corp., Санкт-Петербург, Россия, с использованием метода Vibraimage. Изучалось влияние микроволнового излучения мобильного телефона на физиологическое состояние человека. Тестировались: MRET-Shield (патент США № 6,369,399 B1), японский Clean Pulse 21 (JP), российский Aires (RU), тайваньский Black But (TW).

ПРИМЕРЫ ИЗОБРАЖЕНИЙ И ГИСТОГРАММ СИСТЕМЫ VIBRAIMAGE, ПОЛУЧЕННЫХ В ХОДЕ ТЕСТА:

Рисунок 1. Изображение испытуемого в режиме 'FM' до и после 5 минут воздействия излучения телефона без нейтрализатора.

Рисунок 2. Изображение испытуемого в режиме 'FM' до и после 5 минут воздействия излучения телефона с MRET-Shield.

Изображения на рисунке 1 показывают значительные изменения цветового спектра Vibraimage после воздействия телефона без нейтрализатора (увеличение жёлтых и зелёных областей — рост частот). Это подтверждается изменениями на гистограммах (рис. 3).

Изображения на рисунке 2 показывают незначительные изменения цветового спектра Vibraimage после воздействия телефона с MRET-Shield (незначительный рост частот). Это подтверждается слабыми изменениями на гистограммах (рис. 4) по сравнению с рис. 3.

Рисунок 3. Гистограммы распределения частот тела до (красная линия) и после (синяя линия) 5 минут воздействия телефона без нейтрализатора.

Рисунок 4. Гистограммы распределения частот тела до (красная линия) и после (синяя линия) 5 минут воздействия телефона с MRET-Shield.

Рисунок 5. Гистограммы распределения частот тела до (красная линия) и после (синяя линия) 5 минут воздействия телефона с японским нейтрализатором (JP).

Рисунок 6. Гистограммы распределения частот тела до (красная линия) и после (синяя линия) 5 минут воздействия телефона с тайваньским нейтрализатором (TW).

Рисунок 7. Гистограммы распределения частот тела до (красная линия) и после (синяя линия) 5 минут воздействия телефона с российским нейтрализатором (RU).

Нормализованные изменения среднего значения частот микровибраций тела после 5 минут воздействия излучения телефона с и без нейтрализаторов. Средние значения статистически значимы при p<0,001.

Нормализованные изменения ширины диапазона частот микровибраций тела после 5 минут воздействия излучения телефона с и без нейтрализаторов. Средние значения статистически значимы при p<0,001.

ВЫВОДЫ:

1. Доказано статистически значимое изменение физиологического состояния человека после 5 минут воздействия излучения телефона в режиме разговора.
2. Установка MRET-Shield на телефон значительно снижает уровень изменений физиологического состояния и делает их незначительными.
3. Установка всех других протестированных нейтрализаторов, напротив, увеличивает уровень изменений физиологического состояния человека.